3- ¿Cómo se recuperan las células madre?
El primer paso en la recuperación de células madre de cordón umbilical consiste en una adecuada recolección de la muestra en el momento del parto. Cuanto mayor sea el volumen de sangre que se recolecte, mayor será la cantidad de células madre disponibles para su preservación.
El proceso de recolección puede llevarse a cabo utilizando bolsas estériles similares a las que se utilizan en los bancos de sangre o jeringas estériles. La utilización de jeringas puede proporcionar una muestra de mayor volumen, pero con un riesgo más elevado de contaminación bacteriana. La recolección puede realizarse una vez seccionado el cordón umbilical previo a la expulsión de la placenta (recolección in útero), o después de que la placenta haya sido expulsada (recolección ex útero). Recomendamos la recolección in útero, ya que las contracciones uterinas del alumbramiento ayudan a exprimir la sangre hacia la bolsa de recolección.
Una vez recibida en el laboratorio, la muestra es sometida a un proceso de selección por diferencia de densidad. Esta técnica permite separar los eritrocitos y los leucocitos monomorfonucleares. Una vez aisladas, las células que se van a preservar son tratadas con DMSO y dextrano 40, los cuales actúan como crioprotectores. El almacenamiento se lleva a cabo en bolsas plásticas específicas.
En todos los casos, la sangre materna es sometida a una serie de determinaciones para confirmar que no existan enfermedades infectocontagiosas de transmisión vertical: VDRL, hepatitis B y C, HTLV, HIV y CMV. La ausencia de este tipo de patologías posibilita que las células madre de cordón umbilical sean utilizadas también para transplantes alógenos. Asimismo, las muestras de sangre de cordón umbilical son analizadas para confirmar la ausencia de contaminación microbiológica. La presencia de células madre en la muestra recolectada se determina mediante la identificación del antígeno CD34 en superficie de membrana. La tipificación de antígenos HLA no se realiza de rutina en el momento del procesamiento de la muestra.